Prima Parte Barzon at University Of Padua | Flashcards & Summaries

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TESTE DEIN WISSEN

A cosa bisogna prestare attenzione nella progettazione di un primer?

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TESTE DEIN WISSEN

-Lunghezza (20 basi)

-Composizione basi (% di TC e AG per le stesse temp. di melting) 

-struttura secondaria (evitare ripiegamenti a forcina)

-estremità 3' (evitare complementarietà tra le due basi alle estremità 3' dei due primer= dimeri di primer)

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TESTE DEIN WISSEN

Quanto può essere lungo l'amplicone di una PCR?

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TESTE DEIN WISSEN

< 1 Kb (ma possibile anche da 60 bp la 10 000 bp)

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TESTE DEIN WISSEN

Chi ha inventato la PCR?

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TESTE DEIN WISSEN

Mullis

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TESTE DEIN WISSEN

Quali furono le scoperte che portarono alla PCR?

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TESTE DEIN WISSEN

-DNA polimerasi

-codice genetico

-batterio termorermoresistente (Thermus acquaticus (taq))

-sequenziamento dna

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TESTE DEIN WISSEN

Di cosa necessita la PCR?

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TESTE DEIN WISSEN

- filamento di partenza (target)

- due primer (sequenza nota)

- dna polimerasi termostabile (es: Taq)

- dNTPs

- Mg 2+ (come cofattore)

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TESTE DEIN WISSEN

Come si chiama un appaiamento corretto?

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TESTE DEIN WISSEN

omoduplex

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TESTE DEIN WISSEN

Qual è la temperatura Denaturazione?

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TESTE DEIN WISSEN

>90 °C

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TESTE DEIN WISSEN

Qual è la temperatura di anneling?

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TESTE DEIN WISSEN

30-60 °C

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TESTE DEIN WISSEN

​Qual è la formula per determinare il prodotto dell'amplificazione della PCR?


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TESTE DEIN WISSEN

Y= Q•(1+X) ^2


Q= quantità iniziale di molecole di DNA target

Y= quantità finale di molecole di DNA amplificato

X= efficenza della PCR (da 0 a 1)

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TESTE DEIN WISSEN

Cos'è la Taq polimerasi?

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TESTE DEIN WISSEN

La Dna polimerasi del batterio Thermus acquaticum che è termostabile e che viene utilizzata per la PCR

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TESTE DEIN WISSEN

Qual deve essere la lunghezza dei primer?

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TESTE DEIN WISSEN

Almeno 16 nucleotidi. L'ideale 15/20/30

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TESTE DEIN WISSEN

Cos'è la Temperatura di melting?

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TESTE DEIN WISSEN

Temperatura alla quale il 50% delle molecole di DNA sono denaturate

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Beispielhafte Karteikarten für deinen Prima parte Barzon Kurs an der University of Padua - von Kommilitonen auf StudySmarter erstellt!

Q:

A cosa bisogna prestare attenzione nella progettazione di un primer?

A:

-Lunghezza (20 basi)

-Composizione basi (% di TC e AG per le stesse temp. di melting) 

-struttura secondaria (evitare ripiegamenti a forcina)

-estremità 3' (evitare complementarietà tra le due basi alle estremità 3' dei due primer= dimeri di primer)

Q:

Quanto può essere lungo l'amplicone di una PCR?

A:

< 1 Kb (ma possibile anche da 60 bp la 10 000 bp)

Q:

Chi ha inventato la PCR?

A:

Mullis

Q:

Quali furono le scoperte che portarono alla PCR?

A:

-DNA polimerasi

-codice genetico

-batterio termorermoresistente (Thermus acquaticus (taq))

-sequenziamento dna

Q:

Di cosa necessita la PCR?

A:

- filamento di partenza (target)

- due primer (sequenza nota)

- dna polimerasi termostabile (es: Taq)

- dNTPs

- Mg 2+ (come cofattore)

Mehr Karteikarten anzeigen
Q:

Come si chiama un appaiamento corretto?

A:

omoduplex

Q:

Qual è la temperatura Denaturazione?

A:

>90 °C

Q:

Qual è la temperatura di anneling?

A:

30-60 °C

Q:

​Qual è la formula per determinare il prodotto dell'amplificazione della PCR?


A:

Y= Q•(1+X) ^2


Q= quantità iniziale di molecole di DNA target

Y= quantità finale di molecole di DNA amplificato

X= efficenza della PCR (da 0 a 1)

Q:

Cos'è la Taq polimerasi?

A:

La Dna polimerasi del batterio Thermus acquaticum che è termostabile e che viene utilizzata per la PCR

Q:

Qual deve essere la lunghezza dei primer?

A:

Almeno 16 nucleotidi. L'ideale 15/20/30

Q:

Cos'è la Temperatura di melting?

A:

Temperatura alla quale il 50% delle molecole di DNA sono denaturate

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