Mikrobio at Universität Heidelberg

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Warum wirkt Penicillin bei den im Kurs verwendeten E.coli Bakterien nicht?

Aus: Altklausur 2016, Aufgabe 1

E.coli ist als gramnegatives Bakterium insensitiv gegen Penicillin, da das Penicillin nicht durch die LPS bis zur Peptidoglycanschicht vordringen kann.

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Nennen Sie die Phasen einer lytisch ablaufenden Infektion des Phagen Lambda in der korrekten Reihenfolge. An welcher Stelle müsste die Entscheidung für eine lysogene Vermehrung erfolgen?

Absorption, Injektion, Frühe Synthese, Späte Synthese, Assembly, Lyse
Umschalten in der Phase Frühe Synthese

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Nalidixinsäure(Angriffsort und Resistenzmechanismus)

Gyrase Mutation des Gyrase-Gens

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Nennen Sie die im Kurs verwendeten Antibiotika mit den jeweiligen Angriffsort un den Möglichen Resistenzmechanismus.

Penicilin Transpeptidase ß-Lactamase
Kanamycin Proteinsynthese Phosphotransferase
Nalidixinsäure Gyrase Mutation des Gyrase-Gens

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Penicillin (Angriffsort und Resistenzmechanismus)

Transpeptidase ß-Lactamase

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Kanamycin (Angriffsort und Resistenzmechanismus)

Proteinsynthese Phosphotransferase

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Sie haben die Vermehrung von E. coli durch Messung am Photometer beobachtet und nach 10 min einen OD-Wert von 0,07 und nach 60 min einen OD-Wert von 0,28 gemessen. Rechnen Sie die Generationszeit aus. Welche Voraussetzungen müssen für die Ermittlung der Generationszeit erfüllt sein?

g = log2 x 50min/log0,28 - log 0,07 =25min
Die Kultur muss sich in der exponentiellen Vermehrungsphase befinden und die photometrischen Messwerte müssen zur Zellkonzentration proportional sein.

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Sie finden auf einer Agarplatte mit dem Breitbandantibiotikum Streptomycin Kolonien. ein Teil der Kolonien stellt sich als E. coli, ein anderer Teil als Hefe heraus. Erklären Sie, wie es zu diesem Befund kommen kann

Hefe sind Eukaryonten und deshalb insensitiv gegen die meisten Antibiotika.
E. coli sind Prokaryoten und deshalb sensitiv gegen Streptomycin. Wenn sie trotzdem wachsen, müssen sie resistent geworden sein.

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Stoffmassenkonzentration: 8 mg/ml in µg/l

8000000µg/l

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Stoffmengenkonzentration: 4pmol/ml in mol/l

4x10^-9 mol/l

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Massenprozent: 14% in Soffmassenkonzentration g/l

140 g/l

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Sie wollen einen virulenten Phi 80 Phagen isolieren. Welches Gen bzw. welcher DNA-Abschnitt muss bei diesem Phagen mutiert sein? Geben Sie den Versuch an, durch den dieser Phage von dem Wildtyp-Phagen unterschieden werden kann?

Operationsregion: Phi 80 lysogene Bakterien = Phi 80 immune Bakterien können durch den Wildtyp von Phi 80 nicht erfolgreich infiziert werden, jedoch durch die virulente Operatormutante.

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