Lernmaterialien für Praktikum Laborführung und Hämatologie an der Universität Mainz

- Streulicht-Methode, Impendanz-Methode

- FACS Methode: fluorescence activated cell sorting) (mit Flurogenen markierte AKs interagieren mit Oberflächenantigenen der jeweiligen Zellen) = Durchflusszytometrie

als früher Parameter für Eisenmangel

anstatt Eisen wird Zink in das Hämoglobin eingebaut und kann dann als Zinkprotoporphyrin nachgewiesen werden.

Ursache 

angeborene (meist autosomal - rezessiv), quantitative Störung der Globinkettensynthese.

Charakteristisch  

hypochrome, mikrozytäre Anämie mit Targetzellen im Blutausstrich.

ß-Thalassämie: 

Wegen der verminderten Synthese von ß-Ketten werden kompensatorisch vermehrt γ-Ketten (HbF > 2 % ) oder δ-Ketten (HbA2 > 3 % ) gebildet (Nachweis in der Hb-Elektrophorese). Die α-Ketten bilden Aggregate, die eine intramedulläre Destruktion von Erythrozytenvorstufen und eine ineffektive Erythropoese zur Folge haben. Zusätzlich besteht eine gesteigerte Hämolyse.

α-Thalassämie: 

Aufgrund der reduzierten Synthese von α-Ketten werden kompensatorisch vermehrt ß-Ketten synthetisiert, die ein tetrameres Hämoglobin-H (HbH) bilden. Pränatal werden vermehrt γ-Ketten gebildet (Hb Barts). Der Nachweis der α-Thalassämie in der Hb-Elektrophorese ist nicht möglich, da die Werte für HbF/HbA2 normal bleiben. Das HbH beeinträchtigt die Erythropoese nicht, steigert aber die Hämolyse durch Schädigung der Erythrozytenmembran. Der Schweregrad der Erkrankung hängt davon ab, wie viele α-Ketten vom Defekt betroffen sind: 4 Ketten - letal, 3 Ketten - HbH-Krankheit, 2 Ketten - milde Anämie, 1 Kette - klinisch inapparent, HbH- Zellen fehlen.

Präanalytisch

- hier passieren die meisten Fehler

-> häufigster Fehler: Pat. Verwechselung

- Langes Stauen

- direkte Abnahme aus einem Heparinperfusor

- Nichteinhaltung von Mischungsverhältnissen (Citratblut)

- dünne Kanülen bei der Venenpunktion oder zu schnelle Aspiration des Blutes kann zu Hämolyse führen

Analytisch

systematischer Fehlertyp:

- z.B. durch eine falsch geeichte Messapparatur, oder eine verunreinigte Probe 

- äußern sich in einer (oft) konstanten oder auch proportionalen Verschiebung der Messwerte

- beeinflussen die Richtigkeit, sie können sich sowohl addieren als auch gegenseitig aufheben

- gute Präzision

- schlechte Richtigkeit

zufälliger Fehlertyp:

- durch zufällige Prozesse während des Messens, z.B. das thermische Rauschen des Sensors oder das Quantisierungsrauschen

- beeinflussen die Präzision einer Messung und addieren sich immer (Fehlerfortpflanzung)

- schlechte Präzision

- gute Richtigkeit

Postanalytisch

- Befunde dem falschen Patienten zugeordnet 

- die Darstellung des Befundberichtes in elektronischer Form oder auf Papier ist fehlerhaft 

- der Empfänger zieht aus den Werten falsche Schlüsse

Störgrößen (Methodik):

Veränderung der Analyt - Konzentration

- Probengewinnung

- Kontamination der Probe

- Lagerung

(- Abnahme aus ZVK)

Störung des Messverfahrens

- Hämolyse

- Lipämie

- Bilirubin

- Plasmaexpander

Einflussgrößen (Individuum):

unveränderlich

- Alter

- Geschlecht

- Erbfaktoren

- Rasse

veränderlich

- Krankheit

- Ernährung

- Körperlage

- Medikamente

- zirkadiane Rhythmen

Richtigkeit: 

Übereinstimmung des Messwertes mit dem wahren Wert (Referenzwert) in der untersuchten Probe

Präzision:

Übereinstimmung zwischen wiederholten Messungen; hat keinen numerischen Wert oder

Übereinstimmung bzw. Abweichung mehrerer Messungen aus der gleichen Probe, Angabe als prozentuale Standardabweichung bezogen auf den Mittelwert der Messungen (Variationskoeffizient)

Unpräzision: 

Maß für zufällige Analysefehler (beschreibt die Schwankungen von Mehrfachmessungen um ihren Mittelwert)

Unrichtigkeit: Maß für systematische Analysefehler (beschreibt die Abweichung des Mittelwertes von Mehrfachmessungen vom wahren Wert)

Nachweisgrenze: 

minimale Menge an Analyten, die noch zuverlässig gemessen werden, kann

Nachweisgrenze = Mittelwert (Leerwertmessungen) + 3 SD

linearer Zusammenhang (Korrelation) zwischen Analytkonzentration und Messsignal

Linearitätsbereich:     Konzentrationsbereich, in dem ein linearer Zusammenhang zwischen Analytkonzentration und Messsignal besteht (analytischer Messbereich)

Was macht man, wenn der Wert nicht im linearen Bereich liegt? - so lange verdünnen, bis es stimmt

Interne:  

Gleichzeitige Testung von Kontrollproben mit bekannten Konzentrationen (1x pro Schicht)

Externe: 

regelmäßige Teilnahme an Ringversuchen (alle 4 Jahre)

wenn sie länger stand 

Natrium-Kalium-ATPase arbeitet dann nicht mehr und Kalium strömt aus

Glucose durch Glykolyse verbraucht

Sensitivität: 

Anteil Kranker mit einem positiven Test; richtig positiv

→ bsp. HIV – Test bei Blutspenden oder Transplantationen

Spezifität: 

Anteil Gesunder mit einem negativen Test; richtig negativ