Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie an der Universität Greifswald

Karteikarten und Zusammenfassungen für Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie an der Universität Greifswald

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Fluoreszenz


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Phosphoreszenz

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Beispiele Fluoreszenz

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Fluorochrome

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Fluorophor

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Fluoreszenzprozess

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Stokes Shift

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Parameter zur Beschreibung und zum Vergleich von Fluoreszenzfarbstoffen

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Primärfluoreszenz

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Sekundärfluoreszenz

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Prinzip der Immunfluoreszenz

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Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

Fluoreszenz


  • Form der Lumineszenz
  • optische Strahlung eines physikalischen Systems, die beim Übergang eines angeregten Zustands zum Grundzustand entsteht
  • KEIN Nachleuten
  • kurzzeitige, spontane Emission von Licht beim Übergang eines Elektrons aus einem angeregten Zustand in den Grundzustand
  • Moleküle mit konjugierten Doppelbindungen besonders gut geeignet für die Fluoreszenz

Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

Phosphoreszenz

Form der Lumineszenz

Nachleuten

Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

Beispiele Fluoreszenz

  • Ethidiumbromid
  • Alexa Fluor 488
  • Fluorescein

Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

Fluorochrome

  • Moleküle, die Licht einer bestimmten Wellenlänge absorbieren und einen Teil des absorbierten Lichts als längerwellige Strahlung wieder abgeben
  • durch starken Kontrast oft geringe Konzentrationen des Farbstoffs ausreichend
  • natürliche oder synthetische Farbstoffe
  • müssen spezifisch an Strukturen binden oder sich selektiv in bestimmten Kompartimenten anreichern
  • Farbe und Intensität des emittierten Lichts sind charakteristische Eigenschaften des jeweiligen fluoreszierenden Moleküls

Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

Fluorophor

Komponente des Fluorochroms, die für die Fluoreszenz verantwortlich ist

Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

Fluoreszenzprozess

  • cyclisch
  • gleiches Fluorochrom kann wiederholt angeregt und detektiert werden
  • Ausnahme: Photobleaching

Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

Stokes Shift

Differenz zwischen Anregungs- und Emissionswellenlänge

Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

Parameter zur Beschreibung und zum Vergleich von Fluoreszenzfarbstoffen

  • Quantenausbeute (quantum yield)
    • Verhältnis der Anzahl der emittierten Photonen zur Anzahl der absorbierten Photonen
  • Extinktionskoeffizient 
    • Kapazität für die Lichtabsorption bei einer bestimmten Wellenlänge
  • Fluoreszenzlebensdauer (fluorescent lifetime) 
    • die Zeitspanne, die ein Molekül im angeregten Zustand verbleibt, ohne ein Photon zu emittieren

Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

Primärfluoreszenz

Stoffe, die ohne Vorbehandlung fluoreszieren, 

charakteristischer Vertreter: Chlorophyll

Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

Sekundärfluoreszenz

Markierung nicht selbst fluoreszierender Objekte mit einem Fluoreszenzfarbstoff (Fluorochrom)

Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

Prinzip der Immunfluoreszenz

  • Kopplung eines Fluoreszenzfarbstoffs mit einem Antikörper 
  • Prinzip: Markierung eines Moleküls mit einem Antikörper -> Visualisierung über einen Fluoreszenzfarbstoff (Fluorochrom)

Molekulare Grundlagen der Mikrobiologie

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