Tet1 an der Universität Duisburg-Essen

Karteikarten und Zusammenfassungen für Tet1 an der Universität Duisburg-Essen

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Beispielhafte Karteikarten für Tet1 an der Universität Duisburg-Essen auf StudySmarter:

Name the formula used for the quantification of protein by UV/VIS spectroscopy in the presence of nucleic acids.

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For which range of wavelenght measurements are quartz cuvettes useful?

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What is the major application of UV/VIS?

Beispielhafte Karteikarten für Tet1 an der Universität Duisburg-Essen auf StudySmarter:

How does the complexation of Cu+ ions with Bicinchoninate work to quantify colorimetric proteins (BCA assay)?

Beispielhafte Karteikarten für Tet1 an der Universität Duisburg-Essen auf StudySmarter:

How can the complexation of proteins with Coomassie Brilliant Blue can be observed (in the Bradford assay)?

Beispielhafte Karteikarten für Tet1 an der Universität Duisburg-Essen auf StudySmarter:

Why are the factors in the Protein quantification formula by Warburg and Christian important?

Beispielhafte Karteikarten für Tet1 an der Universität Duisburg-Essen auf StudySmarter:

Put the following side chains in order according to extinction coefficient ∊: Phenylalanine, Tyrosine, Tryptophan

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Under which condition can the BCA assay not be applied?

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How do you interpret an absorbance value of A < 1.0?

Beispielhafte Karteikarten für Tet1 an der Universität Duisburg-Essen auf StudySmarter:

How do you interpret an absorbance value of A > 1.0?

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What are the direct and indirect modes of UV/VIS measurements?

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How is a calibration curve prepared?

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Beispielhafte Karteikarten für Tet1 an der Universität Duisburg-Essen auf StudySmarter:

Tet1

Name the formula used for the quantification of protein by UV/VIS spectroscopy in the presence of nucleic acids.
Protein quantification by Warburg/Christian:

Protein concentration = (1.55 * A280) – (0.76 * A260)

Tet1

For which range of wavelenght measurements are quartz cuvettes useful?
> 200 nm

Tet1

What is the major application of UV/VIS?
Quantification of analytes e.g. proteins or DNA,
also enzyme kinetics

Tet1

How does the complexation of Cu+ ions with Bicinchoninate work to quantify colorimetric proteins (BCA assay)?
Cu2+ ions are reduced to Cu+ ions in the presence of proteins, Bicinchoninate then forms a coloured complex with the Cu+ ions which is detected at 562 nm.

Tet1

How can the complexation of proteins with Coomassie Brilliant Blue can be observed (in the Bradford assay)?
Before complexation, the absorption is at 465 nm, but after the Coomassie Blue binds to protein, there is a shift of absorption maximum from 465 nm to 595 nm (which shows complexation).

Tet1

Why are the factors in the Protein quantification formula by Warburg and Christian important?
The factprs balance the averafe contributions of proteins and nucleic acids to the total UV absorption of the sample.

Tet1

Put the following side chains in order according to extinction coefficient ∊: Phenylalanine, Tyrosine, Tryptophan
Tryptophan (∊ = 6000 l/mol cm) > Tyrosine (∊ = 1500 l/mol cm) > Phenylalanine (∊ = 200 l/mol cm)

Tet1

Under which condition can the BCA assay not be applied?
Not applicable in the presence of other reducing agents (e.g. ascorbic acid, DTT, glutathione)

Tet1

How do you interpret an absorbance value of A < 1.0?
If more than 80% of light intensity reaches the detector, the accuracy is impaired because I and I0 do not differ a lot.

Tet1

How do you interpret an absorbance value of A > 1.0?
If A > 1.0, less than 10% of light intensity reaches the detector, which impairs the accuracy of quantitative measurement.

Tet1

What are the direct and indirect modes of UV/VIS measurements?
Direct mode: Analyte of interest contains chromophore
Indirect mode: Chromophore must be bound to analyte first

Tet1

How is a calibration curve prepared?
– Preparation of 5-10 standards (in concentration range of interest) (dilution of pure target analyte)
– Absorbance values should be equidistant in an absorbance range of 0.1 – 1.0

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