Testverfahren (Referate)

Karteikarten und Zusammenfassungen für Testverfahren (Referate) an der LMU München

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Terrestrial Plant Test

Durchführung

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Terrestrial Plant Test

Welche Pflanzen werden analysiert?

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Testung

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Arsen-Algen

Schadwirkungen

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Arsen-Algen

Detoxifizierung von Arsen

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Arsen-Algen

Algen

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Arsen-Algen

Arsen Vorkommen

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Algen-Arsen

Vorraussetzungen

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Arsen-Algen-Test

Nachweis

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Comet-Assay

weitere Beispiele

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Ergebnisse

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Testverfahren (Referate)

Terrestrial Plant Test

Durchführung

Je nach erwartetem Expositionsweg:
1. Chemikalie wird mit Substrat gemischt, danach wird gesät
2. Zuerst wird gesät, danach die Chemikalie Oberflächlich aufgetragen

Testbedingungen

• Annähernd natürliche Bedingungen (Temperatur, Feuchtigkeit, CO2-Konzentration, Licht, Bewässerung, …)
• In kontrollierter Umgebung (Gewächshaus, Phytotron (=Klimakammer))

Auswertung

Vergleich mit der Kontrollgruppe

Testverfahren (Referate)

Terrestrial Plant Test

Welche Pflanzen werden analysiert?

Vor allem „cash crops“, also Feldfrüchte, die für den kommerziellen Anbau bestimmt sind.

• Schutzgut = Feldfrüchte, die kommerziell angebaut werden
Werden aus (finanziellem) Interesse der Bauern ausgewertet
• Andere Pflanzen = Ackerrandvegetation, Beikräuter, …
Werden aus Gründen des Schutzes der Artenvielfalt ausgewertet.

Testverfahren (Referate)

Terrestrial Plant Test

Testung

Auswirkungen von Chemikalien auf die Keimung von Samen und auf das frühe Wachstum der Pflanze

Testverfahren (Referate)

Arsen-Algen

Schadwirkungen

  • Störung des Phosphatmetabolismus (Essenzieller Nährstoff)
  • Hemmung der ATP-Bildung
  • Oxidativer Stress (Bildung sehr reaktiver Sauerstoffverbindungen)
  • Binden an Thiol-Gruppen von Enzymen und Gewebeproteinen
    –> Treten auf, wenn Detoxifizierungsmechanismen überlastet sind

Testverfahren (Referate)

Arsen-Algen

Detoxifizierung von Arsen

  • Reduktion von Arsenat zu Arsenit + Ausscheidung oder:+ Komplexbildung mit Glutathion + Einlagerung in Vakuole
    Metallbindende Proteine können Arsen binden
  • Methylierung + Ausscheidung 
  • Ausschluss von Arsenverbindungen aus der Zelle und/oder dem Organismus

Wichtig: Detoxifizierung ist abhängig von Art/Organismus und den darauf ablaufenden Reaktionen

Testverfahren (Referate)

Arsen-Algen

Algen

wichtiger Bestandteil aquatischer Lebensräume

Arsen-Toleranz abhängig von:

  • Algenart
  • Arsenspezies, -exposition
  • pH-Wert

Testverfahren (Referate)

Arsen-Algen

Arsen Vorkommen

primär vorkommend in Gewässern

sekundär vorkommend in Algen/Meereslebewesen durch Bioakkumulation

Anthropogen durch Zinkgewinnung, Schädlingsbekämpfung

Testverfahren (Referate)

Algen-Arsen

Vorraussetzungen

  • Kulturen mit exponentiellem Wachstum
  • einheitliche Nährstoff- und Lichtversorgung
  • Infos über Prüfsubstanz (Löslichkeit, Abbaubarkeit)

Testverfahren (Referate)

Arsen-Algen-Test

Nachweis

  • Auswirkungen von Arsen auf Wachstum von Algen
  • Bestimmung des Ausmaßes einer potentiellen Umweltvergiftung

Testverfahren (Referate)

Comet-Assay

weitere Beispiele

Aromatische Amine in Haarfärbemittel

3D Hautmodelle

Testverfahren (Referate)

Comet-Assay

Ergebnisse

  • nur geschädigte DNA kann aus dem Zellkern wandern
  • wandernde DNA-Bruchstücke hinterlassen einen leuchtenden Schweif
  • Auswertung der geschädigten (mit Schweif) und ungeschädigten (ohne) Zellkerne

Testverfahren (Referate)

Comet-Assay 

Durchführung

  • Chemikalien führen zu Strangbrüchen
  • entnahme von Zellen und Behandlung mit Fluoreszensfarbstoffen
  • einbetten in Agarose, lysiert
  • Gelelektrophorese

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