Zellkultur an der Hochschule Weihenstephan-Triesdorf

Karteikarten und Zusammenfassungen für Zellkultur an der Hochschule Weihenstephan-Triesdorf

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Hygenic Design von Inkubatoren

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Chromosomenmutationen Arten und Auswirkung?

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Adhärente Zellen 

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Vorteile der Zellkultur?

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Suspensionszellen

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Definition  Zellkultur

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Aufgabe der Zellkultur: Simulation der "In vivo Umgebung" - > Ausrüstung 

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Vermeidung von Mykoplasmenkontaminationen

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Kulturgefäße für adhärente Zellen vorbereiten? Ecm Komponenten und Vorteile

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Auflösung eines Mikroskops erhöhen durch?

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Wichtiges zu Beachten beim Autoklavieren

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Zellkultur

Hygenic Design von Inkubatoren

  • keine Schweißnähte im Innenraum
  • Abgerundete Ecken 
  • möglichst wenig Gestänge und Schrauben 
  • leichte Demontage 

Zellkultur

Chromosomenmutationen Arten und Auswirkung?

  • numerisch (Monosomie, Polysomie, jeweils fehlen oder zusätzliches Auftreten eines Chromosoms)
  • strukturell (Austausch oder Verlust großer Chromosomenabschnitte: Deletion, Inversion ect.)
  • Auswirkung: Krankheiten, Behinderungen, Fehlbildungen, Entstehung von Onkogenen

Zellkultur

Adhärente Zellen 

  • leitet sich vom Gewebe ab, die in vivo nicht beweglich sind (Muskelzellen, Neuronen, Endothelzellen)
  • Wachsen auf einer Oberfläche
  • Mono- und Multilayer möglich (3D) -> Kontaktinhibition
  • Bsp. HeLA-Zellen 

Zellkultur

Vorteile der Zellkultur?

  • leichte Beschaffung der Zellen 
  • langfristige Lagerung möglich (Haltbarkeit)
  • permanente Zelllinien erlauben zeitlich ausgedehnte Versuchsreihen 
  • reduzieren von Tierversuchen 

Zellkultur

Suspensionszellen

  • abgerundete Oberflächen
  • frei im Medium schwimmend, wachsen in Einzelzellen oder Klümpchen
  • nicht verankerungsabhängig -> keine Kontaktinhibition
  • zirkulieren meist auch in vivo 
  • Bsp. CHO-Zellen 

Zellkultur

Definition  Zellkultur

„Zellen zu erhalten und zu vermehren in einer kontrollierten Umgebung außerhalb eines Organismus.“


Zellkultur

Aufgabe der Zellkultur: Simulation der "In vivo Umgebung" - > Ausrüstung 


    1. Inkubator (Temperatur, Luftfeuchte, Begasung)
    2. Kulturgefäß und -substrat (Größe, Beschichtung, Glas oder Plastik)
    3. Medium (Ionenmilieu, pH-Wert, Versorgung an Nährstoffen, Ergänzung von Stoffwechselprodukten, Wachstumsfaktoren, Hormonen)

Zellkultur

Vermeidung von Mykoplasmenkontaminationen

  • Quarantäne von Kulturen aus Fremdlabors
  • unabhängige Testverfahren
  • jede Charge testen 
  • steriles Arbeiten 
  • Medien nicht gleichzeitig für unterschiedliche Kulturen verwenden 

Zellkultur

Kulturgefäße für adhärente Zellen vorbereiten? Ecm Komponenten und Vorteile

ECM Komponenten:

  • natürlich vorkommend:
    • Gelantine
    • FCS (Fetales Kälberserum)
    • Kollagen
    • Laminin
    • Fibronektin 
  • synthetisch: 
    • Poly-D/L-Lysin
    • Poly-L-Ornithin

Vorteil: bessere Anheftung der Zellen, Steuerung und Differenzierung 

Zellkultur

Auflösung eines Mikroskops erhöhen durch?

  • kurzwelliges Licht (blau) 
  • große Brechungsindex
  • Immersionsöl 
  • große Objektivlinse

Zellkultur

Wichtiges zu Beachten beim Autoklavieren

  • alles getrennt autoklavieren
  • Decken andrehen (Überdruck vermeiden)
  • Sterilisationsetikett anheften
  • NIE Medien nach Zugabe von AS und Zuckern autoklavieren -> Karamelisierung

Zellkultur

4 Nachweismethoden Mykoplasmen

  • DAPI-Färbung (schnell, einfach)
    • durchdringt Zellmembran (sehr langsam)
    • lagert bevorzugt an DNA 
  • PCR (ribosomale RNA, günstig,sensitiv)
  • ELISA
  • Elektronenmikroskop (ungeeignet für Routine)

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