Tierzucht und Genetik an der Freie Universität Berlin

Karteikarten und Zusammenfassungen für Tierzucht und Genetik an der Freie Universität Berlin

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klassische Methoden zur GMO- Erstellung:

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Was sind Hauptgene?

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Risiken klassischer Gentransfer:

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Wofür kann man GMO's nutzen?

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Sequenzierung- Ziel:

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Sequenzierung- Kettenabbruch Synthese (Sanger Methode):

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DNA- Amplifikation

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Schritte des NGS (= NextGenerationsequencing)

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PCR- Ablauf:

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SNP- Chips:

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Definition Mutationen:

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Tierzucht und Genetik

klassische Methoden zur GMO- Erstellung:

  • Mikroinjektion rekombinierter DNA
  • Infektion mit Viren (Transduktion)
  • Transfer in Zelllinien: Kerntransfer bei Maus und Nutztieren

Tierzucht und Genetik

Was sind Hauptgene?

Gene mit großem Beitrag zur Ausprägung polygener Merkmale (ihre Effekte sind Hautpgeneffekte), sie werden häufig als QTL bezeichnet.

Auffinden dieser Regionen mit Kopplungs- und/ oder Assoziationsanalysen

Tierzucht und Genetik

Risiken klassischer Gentransfer:

  • Integrationsort ist zufällig (mögliche Insertionsmutationen)                                  
  • Expression vom Integrationsort (Positionseffekt) und Anzahl der integrierten Kopien abhängig
  •        bekannte „Leistungsmerkmale“ sind polygen  
  • Zerstörung der Homöostase, unkontrollierbare Auswirkungen auf die Tiergesundheit    
  • sehr hohe Erstellungskosten


Tierzucht und Genetik

Wofür kann man GMO's nutzen?

  • Grundlagenforschung
  • Leistungsverbesserung bei Nutztieren
  • Veränderte Proteinzusammensetzung -> functional food
  • Herstellung therapeutisch wirksamer Proteine/Peptide

Tierzucht und Genetik

Sequenzierung- Ziel:

Bestimmung der Basen- Reihenfolge in der DNA- Kette

Tierzucht und Genetik

Sequenzierung- Kettenabbruch Synthese (Sanger Methode):

Einbau von farblich markierten Abbruchnukleotiden, deren Wellenlängen anschließend via Laser gemessen werden. Auftrennung durch Gelelektrophorese. Sequenzierungslänge: 500- 1200bp

Tierzucht und Genetik

DNA- Amplifikation

Prozess der in vitro- Vermehrung von DNA Fragmenten mittels Polymerase

Tierzucht und Genetik

Schritte des NGS (= NextGenerationsequencing)

  • Anreicherung (Erstellen einer Library+ Vervielfältigung der Fragmente durch PCR)
  • Sequenzierung
  • Auswertung

Tierzucht und Genetik

PCR- Ablauf:

  • Öffnen der Wasserstoffbrücken durch Hitze (Denaturierung)
  • Anlagern der Primer an Zielsequenz (Annealing)
  • Strangaufbau durch Polymerase (Elongation) 

-> Wiederholung des Grundzyklusses 25-25 mal, Ergebnis: Ca. 5 Mio Kopien des DNA- Bereichs

Tierzucht und Genetik

SNP- Chips:

Oligonukleotid- Arrays: Hybridisierung der DNA an allelspezifischen Oligonukleotiden -> bei perfekter Bindung entsteht ein Fluoreszenzsignal

-> Signal wird örtlich lokalisiert und einem bekannten Allel zugeordnet

Tierzucht und Genetik

Definition Mutationen:

  • plötzliche qualitative/ quantitative Änderungen des Informationsgehalts der Zelle (des Wildtyps)
  • Ursache für die genetische Variabilität
  • Sie erfolgt spontan, wenn ohne erkennbare Ursache
  • Sie erfolgt induziert wenn bekannter äußerer Einfluss wie Strahlung, Gift, Stress, usw.

Tierzucht und Genetik

Weitere Formen der Sequenzierung:

Pyrosequenzierung

Sequenzierung durch Ligation

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