Gentechnologie at Universität Tübingen | Flashcards & Summaries

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TESTE DEIN WISSEN

ursprüngliche Funktion Restriktionsenzyme

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TESTE DEIN WISSEN

Schutz vor fremden DNA

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TESTE DEIN WISSEN

Was macht Restriktionsnuklease

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TESTE DEIN WISSEN

schneidet DNA-Doppelstrang an Erkennungssequenz 

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TESTE DEIN WISSEN

Produkt aus DNA schneiden

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TESTE DEIN WISSEN

klebrige, glatte, stumpfe Enden

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TESTE DEIN WISSEN

Funktion Ligasen

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TESTE DEIN WISSEN

verknüpfen DNA Fragmente

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TESTE DEIN WISSEN

Verfahren zur Vermehrung der DNA

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TESTE DEIN WISSEN

Klonierung, PCR (=Polymerasekettenreaktion)

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TESTE DEIN WISSEN

Schritte Klonierung

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TESTE DEIN WISSEN

Ausschneiden

Ligation

Transformation

Kultivieren Bakterien und Isolieren DNA (Plasmid)

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TESTE DEIN WISSEN

Transformation

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TESTE DEIN WISSEN

einbringen rekombinierten Plasmids in E. coli

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TESTE DEIN WISSEN

Komponenten für PCR

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TESTE DEIN WISSEN

Template = DNA Matrix

Primer = Oligonukleotide

Nukleosid-Triphophate: dNTPs

DNA Polymerase: thermostabiles Enzym (Taq Polymerase), Puffer

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TESTE DEIN WISSEN

Verfahren zur Selektion auf Plasmid mit Insert (=fremde DNA)

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TESTE DEIN WISSEN

Blau-weiß-Selektion mit x-Gel

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TESTE DEIN WISSEN

Gewinnung von Genen

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TESTE DEIN WISSEN

Genomsequenzierung

Shotgun-Methode

PCR-Methode

Gensynthese

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TESTE DEIN WISSEN

Temperaturprofil bei PCR

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TESTE DEIN WISSEN

Denaturierung: 94-96 °C

Anlagerung: 45-72°C

Verlängerung: 72-74°C

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TESTE DEIN WISSEN

Wie selektiert man bei Transformation

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TESTE DEIN WISSEN

auf plasmidhaltigen Bakterien mit Antibiotika

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Q:

ursprüngliche Funktion Restriktionsenzyme

A:

Schutz vor fremden DNA

Q:

Was macht Restriktionsnuklease

A:

schneidet DNA-Doppelstrang an Erkennungssequenz 

Q:

Produkt aus DNA schneiden

A:

klebrige, glatte, stumpfe Enden

Q:

Funktion Ligasen

A:

verknüpfen DNA Fragmente

Q:

Verfahren zur Vermehrung der DNA

A:

Klonierung, PCR (=Polymerasekettenreaktion)

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Q:

Schritte Klonierung

A:

Ausschneiden

Ligation

Transformation

Kultivieren Bakterien und Isolieren DNA (Plasmid)

Q:

Transformation

A:

einbringen rekombinierten Plasmids in E. coli

Q:

Komponenten für PCR

A:

Template = DNA Matrix

Primer = Oligonukleotide

Nukleosid-Triphophate: dNTPs

DNA Polymerase: thermostabiles Enzym (Taq Polymerase), Puffer

Q:

Verfahren zur Selektion auf Plasmid mit Insert (=fremde DNA)

A:

Blau-weiß-Selektion mit x-Gel

Q:

Gewinnung von Genen

A:

Genomsequenzierung

Shotgun-Methode

PCR-Methode

Gensynthese

Q:

Temperaturprofil bei PCR

A:

Denaturierung: 94-96 °C

Anlagerung: 45-72°C

Verlängerung: 72-74°C

Q:

Wie selektiert man bei Transformation

A:

auf plasmidhaltigen Bakterien mit Antibiotika

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