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Karteikarten
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Studierende
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Lernmaterialien
Funktion Biuret-Reagenz
Nachweisreagenz füür Peptidbindungen (Photometrie)
z.B. Proteinbestimmung nach Lowry
Was ist tailing?
Substanzen mit sauren/basischen Eigenschaften (stark polaren Gruppen) zeigen einen länglichen Fleck auf der DC auf, da sie starke WW mit polaren stationärne Phase eingehen aufgrund ihrer teilweise dissoziierten/ionischen Struktur
Funktion von SDS
eingesetzt bei Elektrophorese:
-Überdeckung der Proteineigenladung (-> dadurch nur Trennung nach Größe)
-Denaturierung
Restriktionsenzym:
a) Synonym
b) Enzymhauptklasse
c) Funktion
a) Endonuklease
b) Hydrolase
c) schneidet Esterbindung zwischen Phopshatgruppe und Zucker (Phosphodiesterbindung) im DNA-Rückgrat
Was ist reversed phase?
DC Platte mit unpolarer Oberfläche z.B. Dialkyldichlorsilan C2-C18 Ketten)
-> zur Trennung von lipophilen Stoffen
Fragen zur Gelelektrophorese:
1) SDS Page: Auftrennung nativ oder denaturiert?
2) Wie färbt man Banden ein?
3) Wie färbt man Laufmittelfront ein?
4) Wie denaturiert man Proteine bei Agarose-Gelektrophorese?
1) denaturiert
2) Coomassie Blue
3) Bromphenol/Glycerin-Puffer
4) Formaldehyd, Erhitzen (eigentlich nicht SDS)
Wie kommen 3 Isomere des Plasmids zustande?
3 Konformationen:
supercoiled -> durch Topoisomerase um Torsionsstress zu beseitigen
linear -> Stränge wurden durch Restriktionsendonuklease geschnitten
nicked circle -> nur ein Strang wurde geschnitten
(hier Reihenfolge von schnellsten zu langsamsten)
Funktion Ethidiumbromid bei Agarose-Gelektrophorese?
Ethidiumbromid ist ein DNA bindender Farbstoff
-> lagert sich zwischen die Basen der DNA
-> Interaktion mit Nukleinsäuren nimmt Fluoreszenz zu -> proportional zur Konzentration
Wie kan man DNA vervielfachen?
PCR
Wirtsorganismen wie E.coli
MDR (Multidisplacement-Amplification)
Was braucht man für eine PCR?
Sequenz mit bekannten begrenzenden Oligonukleotidsequenz, Primer dafür, Nukleotid, DNA-Polymerase
-> gesteuert über Temperatur
Was weist die Bornträger-Reaktion nach?
Anthron z.B. Rhein (Anthrachinon)
Dianthron z.B. Sennosid A
Womit färbt man DNA im Gel an?
Midori Green
Coomassie Blue
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