Bioanalytik at TU Dresden

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Elektroendosmose

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2D-Elektrophorese

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Elektrophoresemethode Zonenelektrophorese

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Randbedingung Lambert-beersches Gesetz

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Chemisches Gleichgewicht: Massenwirkungsgesetz und Gleichgewichtskonstante 

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Sättigungskonzentrationen

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Bronsted: Säuren, Basen und Ampholyte

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Was heißt Stöchometrisch

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Chelatoren

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Indirekte Titrationen eignen sich für:

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Bioanalytik

Elektroendosmose
im elektrischen Spannungsfeld durch negative Festladung des Trägers hervorgerufene Flüssigkeitsbewegung von Anode zu Kathode, die die entgegengesetzt gerichtete Wanderung der Proteine hemmt 

Bioanalytik

2D-Elektrophorese
- Kombination von isoelektrischen Fokussierung und SDS-Polyacrylamidgelelektrophorese
- muss in dieser Reihenfolge kombiniert werden, da mit denaturierten Proteinen keine IEF durchgeführt werden kann

Bioanalytik

Elektrophoresemethode Zonenelektrophorese

•Elektrophorese mit homogenem Puffergemisch (frei oder Träger stabilisiert) → Puffer hat konstante Zusammensetzung und gleichbleibenden pH-Wert 

- Im Puffer gelöste Substanzen A & B werden in schmaler Zone auf Gelmatrix aufgetragen 

• Dann bei anlegen des Stroms beginnt die Wanderung •Entsprechend ihrer elektrophoretische Mobilität positionieren sich die Bestandteile auf dem Trenngel 

Bioanalytik

Randbedingung Lambert-beersches Gesetz
- Monochromatisches Licht
- Homogen verteilter Analyt
- keine Lichtstreuung
- keine Fotoreaktion

Bioanalytik

Elektroendosmose
im elektrischen Spannungsfeld durch negative Festladung des Trägers hervorgerufene Flüssigkeitsbewegung von Anode zu Kathode, die die entgegengesetzt gerichtete Wanderung der Proteine hemmt 

Bioanalytik

2D-Elektrophorese
- Kombination von isoelektrischen Fokussierung und SDS-Polyacrylamidgelelektrophorese
- muss in dieser Reihenfolge kombiniert werden, da mit denaturierten Proteinen keine IEF durchgeführt werden kann

Bioanalytik

Chemisches Gleichgewicht: Massenwirkungsgesetz und Gleichgewichtskonstante 

Massenwirkungsgesetz beschreibt die Lage des chemisches Gleichgewichts.

  • Eine chemische Reaktion ist auch in umgeehrter Richtung möglich, so nimmt nach Beginn der Reaktion die Geschwindigkeit der Hinreaktion immer mehr ab, während die der Rückreaktion mehr zunimmt.
  • Gleichgewichtskonstante K = c (Produkte)/ c (Edukte) oder K = 10^-pk(s/d) oder pk(s/d) = - lg K
  • K>1 und pk<0 Gleichgewicht liegt rechts
  • K=1 und p=0 Gleichgewicht liegt in der Mitte
  • K<1 und pk>0 Gleichgewicht liegt links

Bioanalytik

Sättigungskonzentrationen

  • gesättigte Lösung: 10^-10
  • Lösung ist unterschritten: 10^-12
  • Niederschlag fällt aus: 10^-14

Bioanalytik

Bronsted: Säuren, Basen und Ampholyte

  • Säuren: Protonendonatoren, H-haltige Verbindungen, die H^+-Ionen auf eine Base übertragen: entsteht H_3O^+ (Unterschied zu Arrhenius: keine Dissoziation, sondern Reaktion mit Wasser, z.B. HCl + H_2O -> H_3O^+ + Cl^- 
  • Basen: Protonenakzeptoren, Verbindungen mit mind. einem freien Elektonenpaar, nehmen H^+-Ionen auf, z.B. NH_3 + H_2O -> NH_4+ + OH^-
  • Ampholyte: Verbindungen, die als Säure und Base reagieren können 

Bioanalytik

Was heißt Stöchometrisch

ohne Nebenreaktionen 

Bioanalytik

Chelatoren

Mehrjährige Liganten, die mindestens 2 funktionelle Gruppen besitzen.

Bioanalytik

Indirekte Titrationen eignen sich für:

  • Anionen, die keine Komplexreaktionen mit EDTA eingehen
  • Kationen, die keine stabilen Komplexe mit EDTA bilden

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