Molekulare Neueobiologie at RWTH Aachen

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Exemplary flashcards for Molekulare Neueobiologie at the RWTH Aachen on StudySmarter:

Wie wird die Expression eines Transgens getrieben?

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Superresolution microscopy - Auflösungsgrenze

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3 Nachteile/Unklarheiten Knock Out eines Gens in einem Organismus

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Nenne 2 Arten von Promotern & wo Transgene durch sie exprimiert werden

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5 Wege die Expression klonierter Eigen-und Fremdgene im Organismus für Erkenntnisse zu nutzen

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Superres. Microscopy - 2 schaltbare Farbstoffe + 1 Bsp.

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1 Problem bei & 1 Alternative zur Erzeugung von „Knock-out“ Tieren

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Was ist ein Konditionaler Knock-out?

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3 Vorteile Knock Out eines Gens in einem Tier

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Was ist ein Knock-Out, was ein Knock-In?

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3 Wesentliche Vorteile der Zwei-Photonen-Anregung:

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Was ist ein Problem der Auflösung bei Fluo.mikroskopie? Wie kann man es umgehen und Nanoscopy möglich machen?

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Exemplary flashcards for Molekulare Neueobiologie at the RWTH Aachen on StudySmarter:

Molekulare Neueobiologie

Wie wird die Expression eines Transgens getrieben?
-Promotor des Gens X treibt Expression des Transgens
-alle Zellen, die den Promotor X anschalten, exprimieren das Transgen

Molekulare Neueobiologie

Superresolution microscopy - Auflösungsgrenze
20 –60 nm

Molekulare Neueobiologie

3 Nachteile/Unklarheiten Knock Out eines Gens in einem Organismus
-Ist das Tier lebensfähig?
-Ist der beobachtete Effekt nur auf das ausgeschaltete Gen zurück zu führen?
-Wird der beobachtete Effekt entwicklungsabhängig ausgelöst?

Molekulare Neueobiologie

Nenne 2 Arten von Promotern & wo Transgene durch sie exprimiert werden
– bei einem ubiquitär angeschalteten Promotor exprimiert jede Zelle das Transgen
– bei einem spezifischen Promotor exprimiert nur ein bestimmter Zelltyp das Transgen

Molekulare Neueobiologie

5 Wege die Expression klonierter Eigen-und Fremdgene im Organismus für Erkenntnisse zu nutzen
– Expression markierter Proteine
– Marker-oder Reporterproteine
– Indikatorproteine
– Aktivierung oder Inhibition definierter Zelltypen
– Abtöten definierter Zelltypen

Molekulare Neueobiologie

Superres. Microscopy - 2 schaltbare Farbstoffe + 1 Bsp.
-Synthetische Farbstoffe
-Fluoreszente Proteine (z.B. Dronpa)

Molekulare Neueobiologie

1 Problem bei & 1 Alternative zur Erzeugung von „Knock-out“ Tieren
Problem: dauert sehr lange!
Viral vermittelter Knock-down geht schneller

Molekulare Neueobiologie

Was ist ein Konditionaler Knock-out?
Organ-oder zelltypspezifischer Knock-out

Molekulare Neueobiologie

3 Vorteile Knock Out eines Gens in einem Tier
-Definierter Genotyp
-Funktionsausfall eines Gens
-Tiere können für „Rescue“ Experimente verwendet werden

Molekulare Neueobiologie

Was ist ein Knock-Out, was ein Knock-In?
Ein Gen wird durch eine modifizierte Sequenz ersetzt.
a) Sequenz führt nicht zu einem funktionellen Protein = Knock-out
b) Sequenz führt zu einem mutierten Protein = Knock-in (z.B. als Tiermodell für menschliche Mutation)

Molekulare Neueobiologie

3 Wesentliche Vorteile der Zwei-Photonen-Anregung:
-Längerwelliges Licht ist weniger schädlich
-Längerwelliges Licht dringt tiefer ein (in vivo Anwendung!)
-Anregung ist minimiert auf winziges Volumen, minimiert Bleichen

Molekulare Neueobiologie

Was ist ein Problem der Auflösung bei Fluo.mikroskopie? Wie kann man es umgehen und Nanoscopy möglich machen?
viele Fluophore gleichzeitig da, deshalb hohes Maß an Überlappung

Lösung: Fluophore „ausschalten“, damit keine Überlappung. Dann kann man für jeden Fluophor die PSF (point spread function) fitten –> hochgenaue Lokalisation

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