Molekularbiologische Methoden at Leibniz Universität Hannover

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Über was sind Basen mit dem Zucker verbunden?

Über glykosidische Bindung

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Aus was besteht eine Transkriptionseinheit?

Aus Promotor, Insert, manchmal Reporter oder Tag und Terminator

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Wie wären das Verhältnis von 260nm/280nm bei reiner DNA und RNA?

Verhältnis OD260/ OD280 um 1,8: reine DNA
- niedrigere Verhältnisse deuten auf Verunreinigungen mit Proteinen und Phenolen
- auch wenn keine Störstoffe vorhanden sind können Salzkonzentration und pH-Wert der DNA-Lösung dazu führen, dass reine DNA nur auf ein Verhältnis von 1,5 kommt
Verhältnis OD260/ OD280 um 2,0: reine RNA
- höhere Verhältnisse deuten auf Verunreinigungen, wie EDTA oder anderen Substanzen, die bei 260nm Licht absorbieren

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Was für Salze gibt es bei der Ethanolfällung und welches ist das am häufigsten genutzte?

Ammoniumacetat
Natriumchlorid
Lithiumchlorid
Natriumacetat
- das am häufigsten genutzte

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Was bedeutet sterilfiltriert?

Hier werden Flüssigkeiten oder Gase durch bakteriendichte Filter entkeimt

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Wozu braucht man degenerierte Primer?

Ableitung eines Primers aus Peptidsequenz
Ableitung aus Sequenzalignment

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Was sind Fehlerquellen beim klassischen Klonieren?

Fehler liegt in PCR
- irgendwas falsch amplifiziert
Fehler im Restriktionsverdau
- wenn direkt in Verdau eingesetzt
  - Taq könnte die 5'-Überhänge auffüllen
Fehler in Ligation
- dNTPs hemmen die Ligase
Fehler in Transformation
- zu viel DNA hemmt
Fehler in Aufreinigung nach PCR

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Gibt es ein einheitliches Verfahren bei der Homogenisation (Gewebe- und Zellaufschluss) bei Eukaryoten?

Nein, je nach Material gibt es unterschiedliche Verfahren

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Warum muss die Zentrifuge aus sein, wenn der Deckel auf ist?

Wegen Korrosion

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Was für verschiedene Klassen gibt es an Plasmiden?

Resistenzplasmide
- Resistenzen gegen Antibiotika, Gifte oder Schwermetalle
Col - Plasmide
- Colicine (Bakteriengifte gegen andere Bakterienarten) z.B. Col E1 von E. coli
- um andere Bakterien zu töten
Degradationsplasmide
- Enzyme für den Abbau seltener Substrate z.B.Toluol, Salicylsäure (häufig in Pseudomonaden)
Virulenzplasmide
- machen Wirtsbakterien pathogen z.B. Ti-Plasmid von Rhizobium radiobacter (Agrobacterium tumefaciens)
Fertilitätsplasmide
- F-Plasmid (F+)→Sexpili, DNA Transfer auf F--Zellen

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Was ist ein Episom?

Plasmid, das durch Rekombination in Wirtschromosom integriert wurde

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Wie berechnet man die Gewichtsprozent?

%(w/v) = (Masse des Feststoff/Volumen der Lösung) * 100

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