Zell- und Gewebekultur at Hochschule Coburg

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Was ist eine Zelllinie

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In vitro Kultivierung

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Suspensionszellen

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Adhärente Zellen

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Relevante Parameter für die „in vitro“ Kultivierung von Zellen

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Was bedeutet T und die Zahl bei der Nomenklatur von Standard Zellkultur Flaschen?

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Flaschen für Adhäsion Oberfläche?

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Flaschen für Suspetionskulturen? 

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Überlegungen zur Kulturführung

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Bodenform Multiwellplatten 

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Oberfläche von Multiwellplatten

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Was ist eine Zelle?

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Zell- und Gewebekultur

Was ist eine Zelllinie

Mit der ersten Subkultur wird aus der Primärkultur eine Zelllinie.

Zell- und Gewebekultur

In vitro Kultivierung

Kultivierung von eukaryotischen Zellen in einem Nährmedium außerhalb eines Organismuses

Zell- und Gewebekultur

Suspensionszellen

• Benötigen keine Unterlage zum Anheften
• Z.B. Blutzellen (Leukozyten, Monozyten, …)
• Pflanzenzellen (Kalluskultur)

Zell- und Gewebekultur

Adhärente Zellen

• Benötigen einen Bezugspunkt zum Anheften 

• Spezifisch für humane und tierische Zellen (z.B. Epithelzellen benötigen in vivo Basalmembran)

Zell- und Gewebekultur

Relevante Parameter für die „in vitro“ Kultivierung von Zellen

• Temperatur und Luftfeuchte
• extrazelluläres Ionenmilieu und Osmolarität
• pH-Wert und Pufferung
• basale Versorgung mit essenziellen Nährstoffen und Sauerstoff (Oxygenierung)
• das Kultursubstrat (im Sinne der Kulturunterlage, z. B. eine extrazelluläre Matrix)
• die „Entsorgung“ der Stoffwechselendprodukte
• die „Vorsorge“ vor Kontaminationen
• Supplementierung mit ergänzenden Stoffwechselprodukten, Wachstumsfaktoren und Hormonen

Zell- und Gewebekultur

Was bedeutet T und die Zahl bei der Nomenklatur von Standard Zellkultur Flaschen?

T = tissue culture treated
Oberfläche für adhärente Kulturen geeignet


Zahl Wachstumsfläche z.B T-175 -> 175 cm2 Fläche

Zell- und Gewebekultur

Flaschen für Adhäsion Oberfläche?

Verbesserte Zellanhaftung durch physikalische Oberflächenbehandlung

Zell- und Gewebekultur

Flaschen für Suspetionskulturen? 

Hydrophobe Oberfläche 

Zell- und Gewebekultur

Überlegungen zur Kulturführung

• Das Medienvolumen sollte bei allen Arten von Kulturgefäßen im Verhältnis zur Wachstumsfläche stets so gehalten werden, dass ein Luft- bzw. Gasaustausch an der Oberfläche stattfinden kann. 


• Günstig ist ein Verhältnis von Wachstumsfläche [cm2] zu Medienvolumen [ml] von ca. 1:2 bis 1:6 


• =>75-cm2-Zellkulturflasche sollte zwischen 15 bis maximal 50 ml Medium enthalten


• je nach Zelllinie und Wachstumsbedingungen an Nährmedium

Zell- und Gewebekultur

Bodenform Multiwellplatten 

F-Boden (Kaminform, flat-b.), 

V-bottom, 

U-bottom

Zell- und Gewebekultur

Oberfläche von Multiwellplatten

- Hydrophiel für Zelladhäsion

- Hydrophop Suspentionskultur

Zell- und Gewebekultur

Was ist eine Zelle?

Kleinste selbstständige Funktionseinheit des Organismus.

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