Chromatografie at Hochschule Anhalt

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Selektivität

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Ziel der chromatografischen Trennung

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Grundlage aller chromatographischen Trennmethoden

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Prinzip der Elutionschromatographie

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Betriebsweisen HPLC

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Betriebsweisen GC:

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Ziel einer chromatographischen Trennung

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Wie ist eine vollständige Trennung ( Basislinientrennung) benachbarter Peaks bei geringst möglichen Zeitaufwand möglich?

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Retentionszeit

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Durchflusszeit/Totzeit

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Anzahl der theoretischen Böden

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Chromatografie

Selektivität

Selektivität ist die Fähigkeit eines Prüfverfahrens, verschiedene nebeneinander zu bestimmende Komponenten ohne gegenseitige Störung zu erfassen

Chromatografie

Ziel der chromatografischen Trennung

  • isolierung einzelner Substanzen aus einem Gemisch
  • Identifizierung der Substanzen
  • Quantifizierung der Substanzen
  • Reinheitskontrolle der Substanzen

Chromatografie

Grundlage aller chromatographischen Trennmethoden

Unterschiede der Verteilungsgleichgewichte der Komponenten unterschiedliche Verteilungskoeffizienten K NERNST'sche Verteilung) einer Mischung in einem Zweiphasengemisch sowie die relative Bewegung der beiden Phasen zueinander

Chromatografie

Prinzip der Elutionschromatographie

  • die stationäre Phase befindet sich im GGW mit der mobilen Phase, die kontinuierlich durch das chrom. Bett strömt
  • die Probe wird als definierte Zone am Säulenanfang aufgebracht und mit der mobilen Phase eluiert
  • im Idealfall sind die Analyte durch Zonen reiner Phasen voneinander getrennt
  • ein geeigneter Detektor registriert die einzelnen Analyte beim Verlassen der Säule

Vorraussetzungen:

  1. Analytsubstanzen müssen löslich sein
  2. Analytsubstanzen müssen mit der stat. Phase in WW treten
  3. Analytsubstanzen müssen detektierbar sein

Chromatografie

Betriebsweisen HPLC

  • isokratisch: mobile Phasenzusammensetzung konstant, ändert sich während des chromatografischen Laufes nicht
  • Gradientenelution: mobile Phasenzusammensetzung ändert sich mit der Zeit ( während des chromatographischen Laufes), Elutionskraft der mobilen Phase wird kontinuierlich erhöht

Chromatografie

Betriebsweisen GC:

isotherm: Trennung bei konstanter Temperatur

temperaturprogrammiert: Erhöhung der Temperatur während der Trennung


Chromatografie

Ziel einer chromatographischen Trennung

  • die einzelnen Komponenten eines Gemisches
  • vollständig voneinander zu trennen
  • mit dem geringst möglichen Aufwand

Chromatografie

Wie ist eine vollständige Trennung ( Basislinientrennung) benachbarter Peaks bei geringst möglichen Zeitaufwand möglich?

  • Optimierung der Peakbreite durch kinetische Variablen, Hth beeinflussen
  • Änderung der Wanderungsgeschwindigkeit durch Variablen, die Retentionsfaktoren und die Selektivitätsfaktoren beeinflussen

Chromatografie

Retentionszeit

  • Zeit bis zum Auftreten des Peakmaximums
  • charakteristisch für eine bestimmte Substanz bei einem gegebenen chromatographischen System 

Chromatografie

Durchflusszeit/Totzeit

Zeit, die die mobile Phase benötigt, um vom Säulenanfang bis zum Säulenende zu gelangen

Chromatografie

Anzahl der theoretischen Böden

Je breiter ein Peak, desto kleiner ist die Anzahl der theoretischen Böden, was für eine weniger effektive Trennung spricht

Chromatografie

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  • soll beschreiben, dass das Packungsmaterial der Säule von Eluent und Analyt umströmt werden muss
  • keinesfalls geradlinig
  • dadurch treten Wirbelströmungen auf und es kommt zu unterschiedlichen Weglängen und so zur Peakverbreiterung
  • unabhängig von der Lineargeschwindigkeit

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