instrumentelle Analytische Chemie at Fachhochschule Campus Wien

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Was sind Nachteile der Agarose als Gelmaterial bei der Gelelektrophorese?

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Was ist das Einsatzgebiet der Agarose bei Gelelektrophoresen?

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Was sind Vorteile des Polyacrylamids bei der Gelelektrophorese?

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Was sind Nachteile des Polyacrylamids bei der Gelelektrophorese?

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Wann (Einsatzgebiet) wird das Polyacrylamid bei der Gelelektrophorese eingesetzt?

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Was sind mögliche Färbemethoden für Proteine?

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Welcher Farbstoff ist wieder austauschbar?

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Was sind Beispiele für spezielle Färbungen?

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Was ist Autoradiographie?

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Was ist die Fluorographie?

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Was sind Färbemethoden für Nukleinsäuren?

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Was sind Vorteile der Agarose als Gelmaterial?

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instrumentelle Analytische Chemie

Was sind Nachteile der Agarose als Gelmaterial bei der Gelelektrophorese?

  • es ist nicht vollständig klar, ob bei Färbungen unter Umständen Probleme wegen Hintergrundfärbungen auftreten können
  • ist nicht endoosmose frei


instrumentelle Analytische Chemie

Was ist das Einsatzgebiet der Agarose bei Gelelektrophoresen?

Trennung von Nukleinsäuren 

Trennung von hochmolekularen Proteinen

instrumentelle Analytische Chemie

Was sind Vorteile des Polyacrylamids bei der Gelelektrophorese?

stabil
klar, gut zu färben
gute Siebwirkung
fast ohne Endoosmose

instrumentelle Analytische Chemie

Was sind Nachteile des Polyacrylamids bei der Gelelektrophorese?

giftig!!! (Monomer!)
für Proteine < 800 kD

instrumentelle Analytische Chemie

Wann (Einsatzgebiet) wird das Polyacrylamid bei der Gelelektrophorese eingesetzt?

Trennung von Proteinen

instrumentelle Analytische Chemie

Was sind mögliche Färbemethoden für Proteine?

Coomassie-Brilliant-Blue
Silberfärbung
Spezielle Färbemethoden
Autoradiographie
Fluorographie

instrumentelle Analytische Chemie

Welcher Farbstoff ist wieder austauschbar?

Comassie Brilliant Blue

instrumentelle Analytische Chemie

Was sind Beispiele für spezielle Färbungen?

  • Enzym - Substrat
  • Antigen - Antikörper

instrumentelle Analytische Chemie

Was ist Autoradiographie?

• Schwärzung von Röntgenfilmen durch radioaktiv
markierte Proteine
• Nachweisgrenze: naturgemäß zu den empfindlichsten
„Färbemethoden“ gehörend

instrumentelle Analytische Chemie

Was ist die Fluorographie?

• Gel wird mit Fluoreszenzfarbstoffen behandelt, die
die Radioaktivität in Fluoreszenzstrahlung umwandeln
• Nachweisgrenze: naturgemäß zu den empfindlichsten
„Färbemethoden“ gehörend

(Fluoreszenz wird also NICHT durch UV Licht angeregt)

instrumentelle Analytische Chemie

Was sind Färbemethoden für Nukleinsäuren?

Ethidiumbromid-Färbung
Silberfärbung
Fluoreszenzfärbung

instrumentelle Analytische Chemie

Was sind Vorteile der Agarose als Gelmaterial?

  • ungiftig
  • einfach herstellbar
  • ideal für hochmolekulare Proteine

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